실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Expression/Purification
his tag protein purification
레벨1 원원이 (대학생)
안녕하세요 학부 연구생으로 현재 protein purification 실험을 준비하고 있습니다. his-tag column에 target protein을 내리고 SDS-PAGE로 우리가 원하는 단백질만 정제가 되는 것을 확인했습니다. 이후에 target protein 2개와 단백질이 반응하여서 어떤물질이 나오는데 그것을 확인하기 위해서 GC로 확인을 합니다. 근데 단백질 정제를 하고난 단백질들은 Elution buffer에 존재합니다. Elution buffer에는 고농도의 imidazole이 들어있는데, 알아본 결과 다음 실험을 진행할때 imidazole이 제거되어야 한다고 들었습니다. 뿐만 아니라 tag제거를 안해도 되는지 여쭤보고 싶습니다. 그냥 Elution buffer에 바로 반응을 진행해도 되는지, 정제 후 과정이 어떻게 이루어지는지가 궁금합니다 ㅠㅠ
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