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질문 transfer 후 ladder가 덜 넘어갔습니다.
알Yoon0618(대학원생)  | 02.25 17:57

transfer 후 ladder가 덜 넘어갔습니다.

같은날 제조하고 같이 running했는 gel인데

한개는 ladder가 젤에 보이지 않고 membrane으로 잘 넘어갔으나,

나머지 하나는 55사이즈부터 ladder가 젤에 남아 있었습니다.

 

transfer 모듈에 같이 꼽고 실험을 진행했는데 이런 현상이 나타나는 이유가 무엇인지 알고 싶습니다.

모듈의 단순 고장으로 인한 것이면 왜 한개만 덜 넘어갔는지 잘 모르겠습니다.

10% 메탄올이 섞인 transfer 버퍼를 사용했고, 80V에서 80분 진행했습니다.

buffer 재사용을 했으며. 이번에 2번째 한것입니다.

보통은 이조건으로 transfer했을때 ladder가 다 넘어갔었는데 이번에만 안넘아간 이유를 알고 싶습니다.

#transfer
 
#ladder
 
#western blot
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올챙이무선충전기  |  02.26 13:56  

같은 조건으로 같은 transfer buffer module을 이용하셨는데 하나는 잘됐고 하나는 잘안됐다면 장비나 buffer에는 문제가 없다는 것이겠지요.

membrane과 gel 사이에 공간이나 기포가 생겨서 옮겨가지 않았는지를 확인해보시는것이 가장 좋지 않을까 싶습니다.

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