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62도 PC도 잘 나온 결과는 아닙니다.
PC의 비특이 band 패턴을 보니 primer 문제로 보입니다.
이런 경우 annealing temp.로 개선이 힘듭니다.
F, R primer가 어떻게 되나요?
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레벨2
쏭달쏭알
(과기인)
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21.02.03 15:14
primer seq. 아래와 같습니다
F-CATGGTCCTGCTGGAGTTCGTG
R-tatccctccctccttcttgaaataa
GFP primer는 아닌것 같네요.
1. primer를 25~27mer로 변경해서 한번 해보세요.
2. gDNA를 전기영동 한번 해보세요.
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레벨2
쏭달쏭알
(과기인)
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21.02.04 02:01
네 gfp primer는 아닙니다.
gDNA를 전기영동 해보라고 하셨는데 gDNA만 로딩해보라는 말씀이신가요??
네. template quality를 한번 보는것이 좋을 듯 합니다.
또한 사진처럼 비특이 band가 전체적으로 나오는 결과는 annealing temp.
조절로는 해결되는 가능성이 거의 낮습니다.
gDNA도 문제가 없으면 primer를 변경해 보세요.