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 전체 > Microbiology > Bacteria
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질문 안녕하세요. bacteria elisa STD 조건에 관해 여쭤봅니다.
알도도형(대학생)  | 01.27 17:59

안녕하세요 현재 연구소에서 실습활동을 하고있는 학생입니다.

Bacteria가 분비하는 독소를 target으로 하는 ELISA를 진행중에 있는데,

STD의 R^2값이 계속 형편없어 선배님들의 조언을 듣고자 글을 작성하게 되었습니다.

현재 2일에 걸쳐 ELISA Sample을 준비하고 있습니다.

이때 Sample은 bacteria로 EGTA를 treat하여 독소 분비를 유발한 뒤 Sup을 harvest하여 OD600nm에서 측정하여 OD1 값으로 희석한 뒤 Centrifugation을 진행 뒤 sup을 Sample로 사용하고 있습니다.

그 과정은

DAY1 : 20h 배양 (LB 5ml/Antibiotics 1:1,000, EGTA 1:100, bacteria Single colony)

DAY2 : 이하 동일 (Single colony가 아닌 DAY1에 배양한 Bacteria sul 1:1000 첨가) 

DAY3 : ELISA

 그 결과

upload_image

위와 같이 나타납니다. 그래서 배양시간, Antibody 조건 등을 바꿔가며 실험을 해봐도 고쳐지지 않아 답답한 마음에 글을 쓰게 되었습니다.

혹시 제가 놓치고 있거나 잘못 진행중인 부분이 있을까요?

 

#ELISA
 
#Standard curve
 
#Bacteria
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  01.27 18:20  

STD가 아니라 sample인것 같습니다.

kit를 사용하나요?

매뉴얼로 재료를 준비해서 실험한다면 1차 항체 양이 적은것 같습니다.

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