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cell 양을 줄여서 해보세요.
cell양을 많이 한다고 분리에 좋지는 않습니다.
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레벨2
지구왕
(대학생)
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21.01.21 18:05
간으로 하였구용.. 항상 그렇게 했었는데 이런 결과가 나와서...
단백질 층이 왜 두껍게 나오는지 궁금합니다..ㅠ
조직이든 cell이든 시료양이 많을겁니다.
어느정도 조직양을 사용했나요?
층분리된 tube 사진이 있으면 한번 봤으면 합니다.
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레벨2
지구왕
(대학생)
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21.01.21 18:38
간 조직 0.1g + trisol 1ml 파쇄 후 chloroform 250ul 넣었습니다.
일반 조직은 TRIZOL 1ml에 ~100mg을 추출해도 되지만 liver, spleen, bone은
조금 줄이는게 좋습니다.
또한 조직이 많으면 tissue + TRIZOL을 넣고 파쇄후 원심 분리 후
sup + CHCl3를 다시 원심분리 하는것이 좋습니다.
사진의 tube는 tissue + TRIZOL을 파쇄 후 CHCl3를 넣고 원심분리한 것이죠?
원심분리는 얼마나 했나요?
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레벨2
지구왕
(대학생)
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21.01.21 19:05
15000rpm에 10분 돌렸습니다!.
원래는 10000rpm에 5분 돌리는데.. 이유를 찾다보니 더 빠른 속도로 돌려보라는 말을 봐서요..
15K에 10분 돌려서 사진같이 나오면 TRIZOL과 CHCl3를 분리해서 처리하면
될겁니다.
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레벨2
지구왕
(대학생)
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21.01.21 19:37
감사드립니다 ㅠ 해보도록 하겠습니다!