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qPCR을 진행할때 흔들린다면 gapdh등 잘 나오는 샘플에서 흔들리나요?
실험을 자주 많이 하다보면 gapdh가 항상 나오는 ct 값 범위가 생깁니다. 그 범위를 넘어가면 다음 target으로 진행해봐도 큰 의미없는 데이터가 나온다는것을 직감적으로 알게 됩니다.
새로산 프라이머로 안된다면 RNA prep부터 새로 하시는게 정석입니다.
커브가 흔들린다는게 같은 샘플이라도 Cq값이 일정치 않다는 뜻인가요?
생각보다 RT가 작은 에러에도 크게 뻥튀기?가 되는 기법이다 보니
파이페팅 에러가 안나게 조심해주시고
housekeeping에서 그런다면 housekeeping을 바꿔보시는 것도
도움이 됩니다