실험 Q&A Microbiology > Bacteria
bacteria elisa 전 bacteria growth curve 측정
레벨3 도도형 (대학생)
안녕하세요 연구실에서 실습을 진행중인 학생입니다.
저는 psuedomonas가 만들어내는 독성 물질을 target으로 하는 elisa를 실험하는 과정에 있습니다.
실험을 6회 정도 반복하였는데 그때마다 STD R Squere값이 매우 낮게 측정됐습니다.
STD의 준비는
Day 1에 streak한 균주를 LB Broth에 inoculation O/N
Day 2때 STD Media change O/N
Day3에 OD600을 측정한 뒤 ep tube에서 OD1값으로 맞춰 diluent와 섞고
1mg/ml > 0.5 " > 0.25 ..... 으로 serial dilution하였습니다.
실험의 결과가 아래와 같이 계속 같은 양상을 보이고 있습니다.
Pipetting의 문제가 아닌 것은 trouble shooting을 통해 확인했습니다.
제가 생각하는 바로는 균주의 생장곡선을 측정하여 OD1값에 대한 배양 시간을 설정하고 진행하는 것이 맞지 않을까 싶어 여쭤보고 싶습니다.
만약 제 생각이 맞다면 DAY 1부터 cfu를 측정해서 OD600값을 측정해야하는 것인지 DAY 2부터 시간 별 OD 600값만 측정해도 괜찮을지 여쭤보고 싶습니다.
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