실험 Q&A Immunology > Antibody
항체 (MAb) 티올화 전처리 후 수율 확인에 관한 질문
레벨2 Ginger Baker (과기인)
안녕하세요,
저희 랩에선 금 자성입자에 항체를 고정시키려 합니다. 공정 전에 항체를 티올화시켜서 전처리하고 있는데, 항체량 1ug 당 14 mM Traut's reagent 4.6 uL 를 넣고 1시간 incubation 한 후 zeba spin desalting column으로 탈염시키고 있습니다.
항체가 티올화가 잘 되었는지 확인하려고 DTNB(Ellman's reagent)를 사용해서 cysteine standard curve를 찍어보려 합니다.
궁금한 점이 항체 하나당 3-7개의 sulfhydryl기와 modification이 된다는데, 이걸 항체 농도에 비례한 sulfhydryl 농도로 나타내려면 어떻게 해야 할까요?? 예를 들면 항체농도 2mg/ml 샘플을 모두 티올화 시켜서 한 항체당 3-7개의 sulfhydryl기가 붙어있다고 하면 Ellman assay를 했을때 나오는 최소 & 최대 티올농도가 궁금합니다.
참고할만한 문헌이나 자료 공유해주시면 정말 감사하겠습니다.
새해 복 많이 받으세요! 감사합니다.
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