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배양 중 총 몇번 그리고 몇반복으로 측정할건가요?
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레벨2
미생물, 셀
(대학생)
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20.12.25 11:37
3반복으로 진행할것이고 약 20시간정도 1시간마다 96 well plat에 100마이크로 넣어서 엘라이자에 흡광도 찍을 생각입니다!!
50~100사이로 하면 충분하고 96well의 흡광도는
cuvette과 다르기 때문에 값을 A600 값으로 사용하기힘듭니다.
cuvette으로 A600을 측정하세요.
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레벨2
미생물, 셀
(대학생)
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20.12.25 21:00
cuvette 이랑 96well plate 가 흡광도가 다른 이유가 뭐에요??
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레벨2
미생물, 셀
(대학생)
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20.12.25 21:44
96well plate 를 590정도로 맞추고 하면 cuvette 랑 비슷하나요??
흡광도(Absorbance)는 cuvette의 통과거리(pathlength)가 1cm를 기준으로
계산해서 나오는 값입니다.
microplate reader은 spectrophotometer과 측정 방식이 다릅니다.
96 well을 사용해도 숫자는 나오지만 일반적으로 사용하는 A600으로
얘기 할수는 없습니다.
또한 96well에서 균 흡광도를 측정하면 균이 바닥으로 가라앉기 때문에
시간이 조금만 지나가도 값이 금방 올라갑니다.
96well은 균체 같이 물에 녹지않는 입자를 측정시 주의가 필요하며
프로그램에서 측정 전 교반 옵션을 사용해서 균체를 균일하게 한 후
측정하면됩니다.
측정된 값은 A600으로 보기는 힘들고 측정한 시료 간 상대적인 값으로
보면 됩니다.
96well을 cuvette값을 환산이 가능한데 환산 계수를 구하면 96well을
측정해서 cuvette을 사용한 A600 값을 구할 수 있습니다.