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지나가다
(비회원)
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08.12.31 16:35
지나가다 비슷한 경험이 있어서 적습니다.
저도 식중독균을 SEM 으로 찍는다고 한 서너달 고생한적이 있어서요.
저 같은 경우엔 균들이 자라면서 LPS등을 뿜어내어 bio-film을 형성하는것을 찍었었는데 얇은 금속판을 잘라서 균이랑 같이 넣어서 키운다음 균이 붙어있는 금속판 채로
고정해서 알콜시리즈로 (50, 60, 70, 80, 90, 100%) Dehydration 한다음 dry 해서 금속코팅하고 관찰했었습니다.
균 특성상 금속판이 아니라도 잘 자란다면 Plastic coverslip 이나 glass cover slip같은데 키워서 관찰해도 잘 되더라고요.
만약 균이 붙어서 자라지 않으면, Plastic coverslip이나 glass cover slip등을
gelatin 이나 Poly-L-lysin 으로 coating 한다음 그위에 배양액을 올려서 10-20분정도 놓아두면 균들이 잘 붙거든요..
그런다음 fixing 과 dehydration 과정을 거쳐서 진행하시면 될듯하네요.
참고로 SEM sample preparation 방법은 google에서 검색하면
많은 protocol 잘 정리되어 나오네요.
그중 하나 링크합니다.
http://bama.ua.edu/~emlab/instructions/sem_fix.html