저도 마우스 실험은 안해봤지만, 내용 적어주신거로 토대로 계산해보면..
일단 가장 고농도인 100mg/kg짜리를 먼저 만들어보죠. 왜냐면 고농도를 먼저 만들고 그걸로 희석해서 낮은 농도를 만들면 되니까요.
자 마우스가 20g 이니까, 100mg/1kg 짜리는 kg단위를 g으로 바꿔주는
(100mg X 20 /1000) / (1kg X20 /1000 (g/kg)) = 2mg/20g
즉 100mg/kg짜리 투여 농도는 2mg/100ul가 되어야 겠죠?
100ul는 1ml에서 10만 나눠주면 되니까, 용해도 계산하면,,,
일단 ethanol and DMF 용해도 50ug/100ul네요. DMSO는 2.5mg/100ul네요.
그럼 선택지는 DMSO뿐이네요,, ethanol and DMF은 용해도가 낮아서요.
(잘 몰라서 그런데, 주사액이 DMSO로 만들어지나요???)
실험은 duplicate에 15일 진행, 즉 최소 30번 injection을 해야 하는데, 100mg/kg 고농도 만든걸로 희석해서 다른 농도도 만들거니까
3, 6, 15 더해서 100mg/kg짜리 만들때 양을 54번 injection할 수준으로 만들면 희석해서 나머지 것도 만들 수 있죠.
(50mg/kg은 100mg/kg짜리보다 2배 낮으니까 30/2 = 15인거고, 20mg/kg은 100짜리보다 5배 낮으니까 30/5 = 6인거고, 10짜리는 100짜리보다 10배 낮으니까 30/10 = 3)
근데 희석하거나 그럴때 loss감안해서 적당히 60번 injection할 수준으로 만들어 봅시다.
그러면 100ul *60번 = 6000 ul 만들어야하고, 농도는 2mg/100ul니까
2*60 mg / 100*60 ul (DMSO) -> 120mg/ 6000ul = 0.12g / 6ml
0.12g (약물) / 6ml (DMSO) 만들고,
그거 필요한 양 만큼 희석해서 낮은 농도짜리 만들어 쓰시면 됩니다.
개인적으론 0.2 g (약물) / 10ml (DMSO)가 같은 100짜리 농도인데, 약물 값이 싸다면 저울 재기 편하게 이 정도로 만들어서 이용할 것 같습니다.
(왠지 실린지 필터같은, 미생물 제거 스텝도 있다면... 추가 loss가 많을 겁니다)
보시어 참고바랍니다. 감사합니다.
단위가 mg/kg이니까 MW는 필요 없고 시료 질량만 생각하시면 됩니다.
하나만 예를 들어 계산하는 법을 구체적으로 적어볼게요.
eg) 10 mg/kg, BW 20 g, volume 100 uL
10 mg/kg을 마우스 BW로 환산하면 0.2 mg/20 g이 됩니다. 따라서 0.2 mg씩 injection하면 되는데 그것을 100 uL에 녹여야하니 0.2 mg/100 uL = 2 mg/mL이 됩니다. 필요한 양만큼 계산한 농도로 녹여서 주입하면 됩니다.
100% DMSO를 쓰기에는 자체 독성이 강하니 식염수 등으로 현탁하여 주입하는 것을 고려하시는 것이 좋습니다.