실험 Q&A Cell Biology > Differentiation/Proliferation
3T3-L1 분화 실험
레벨1 koma1 (대학생)
안녕하세요.
3T3-L1 cell 분화 실험을 하던 중 궁금한 점 있어 자문을 구합니다.
현재 분화키트를 사용하고 있으며, kit 프로토콜에 따르면 분화배지(IBMX, insulin등 포함)를 3일간 처리를 한다고 합니다.
이후 배지는 유지배지(insulin)로 교체하며, 완전하게 분화할 때까지 2일 주기로 배지를 교체한다고 합니다.
제가 키우는 3T3-L1은 분화가 완전히 되기 전에 세포가 몇몇 죽는 것으로 보이며, 또한 최종적으로도 분화가 잘 이뤄지지 않아 고민입니다.
1. 그래서 분화배지를 더 오래 둘까하는데 분화기간을 늘려도 괜찮을까요?
분화 배지 교체는 며칠 주기로 하는 것이 좋을까요 ?
2. 또 3T3-L1의 conditioned media(CM)을 얻으려고 하는데,
인슐린이 든 배지를 수집을 하는 것인지, 분화를 다 마치고 100% DMEM로 배지를 바꾼 후, 교체할 때마다 배지를 얻어내는 것인지 궁금합니다 !
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