실험 Q&A Cell Biology > Cell lysis/Apoptosis
Rhodamine123으로 Mitochondrial Membrane Potential 확인
레벨2 z크핫z (대학생)
안녕하세요. 저는 석사생 1년차 입니다.
Antimicriobial Peptide 사용하여 Mitochondrial Membrane Potential 확인을 하려고 합니다.
chamber slide 를 사용하였으며, 12H Treatment 한 다음 Rho123을 30uM으로 37도씨에서 30min Incubation 하고 PBS 로 washing x2 후 DAPI Antifade로 RT 에서 30min Incubation 후 커버슬립을 덮고 현광현미경을 통해 확인을 하였습니다.
DAPI 는 핵에 염색이 되며, Rho123는 세포질에 염색이되어 Merge하면 하나의 세포가 형성이 되야 한다고 생각이 됩니다.
하지만 같은 부분에서 DAPI염색 세포와 Rho123 염색 세포가 따로 염색이 되는 현상이 나타나고 있습니다. 2번을 해보았지만 동일한 현상이 적용되고 있는 터라 고민이여서 선생님분들께 자문을 구하게 되었습니다.
(Rho123을 PBS로 희석하여 시도 x1, DMEM (FBS x)로 희석하여 시도 x1 해 보았습니다.)
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