- 유산균이나 다른 균들은 glycerine stock으로 보관시 균수가 감소하지 않는데

왜 Bacillus subtilis만 계속 이렇게 균수가 급격히 감소하는걸까요?

: 실험 방법에 어떤 문제가 있는 것으로 보이고 별로 감소하지 않습니다.

냉동 보관균의 생균수는 벼롤 중요하지 않습니다.

완전히 죽지만 않으면 액체 배양 시 다시 10^8 이상 자랍니다.

- 포자가 형성됐다면 위상차현미경상에 포자가 보여야하는데 큰 차이를

확인하지 못해서요...

: 위상차에서 일부 보이지만 빛 굴절로 잘 안보입니다.

염색해서 보는것이 확실하게 보입니다.

bacillus는 spore 때문에 냉장 보관해도 오래 보관가능하며 냉동 보관시 균체가

줄어도 별 상관없습니다.

액체 배양하면 잘 자라기 때문에 다시 사용가능합니다.

- glycerine stock에서의 균수 감소 원인은 무었일까요? (glycerine 함량 25%)

: 균보관이 크게 어려운 실험이 아니기 때문에 문제점 발견하기가 여러운데

균과 glycerol을 완전히 균일하게 혼합 후 냉동하는 것이 중요합니다.

- Bacillus 종균을 보관할 때 plate나 stock, 앰플형식 외에 주루 사용하는

방법이 있나요?

: spore를 보관하는 것도 좋습니다.

spore 보관법은 어떻게 진행해야 하는 건가요?

100% spore 보관은 힘들지만 90% 영양체를 spore로 전환시켜 냉동보관하면

됩니다.

보통 spore 생산 배지를 사용하면 좋지만 LB를 사용해도 무방하며

7일 배양 후 냉동보관에 사용하면 됩니다.