실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
western blot wet transfer이 안됩니다
레벨1 asefpjv (대학생)
말그대로 갑자기 transfer가 되질 않습니다.
다시 만들어야 될 데이터가 생겨서 블랏팅을 진행하고 있는데 이전에 만들어 두었던 프로토콜 그대로 하고 있습니다.
그런데 트랜스퍼 과정에서 전혀 트랜스퍼가 되질 않습니다.
멤브레인에 남는 단백질이 전혀 없다고 해야 될까요...
마커가 조금 남긴 하는데 모두 번지고 다른 라인에 붙어있고 그럽니다.
전류나 전압 변화도 해보고, 버퍼 조성도 이것저것 해봤는데 계속 똑같이 transfer가 안되네요
젤에서 단백질이 나오기는 하는것 같은데 멤브레인에 붙지를 못하는건지... pvdf membrane이 그런경우가 있을까요? 새로산 biorad pvdf membrane이긴 한데 이전이랑 같은 제품이라 그것도 아닌것 같고, dot blot 해보면 잘되기도 하고...
검색해서 나오는 troubleshooting에서 이것저것 시도해봤는데 잘 안됩니다. 혹시 사소하게 생각하지 못하는 문제점을 발견했던분 있을까요
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