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질문 RT-PCR 후 전기영동(아가로즈 1.5% 겔) 시 새는 현상 질문드려요.
알Starflower(대학원생)  | 2020.11.26 15:23
첨부파일 파일첨부: 1606371514867.jpg (1.08 MB)
이미지 첨부파일

안녕하세요.

 

RT-PCR 후 아가로즈 1.5g을 1XTBE 100ml에 녹인 후

 

전기영동하는데 저렇게 한부분만 well이 새는현상이 나타나서

 

질문드립니다.

 

약 40분에서 1시간정도 굳히고

 

다음날 전기영동하기 위해 호일로 감싸서 4도씨 냉장고에 넣었습니다.

 

그리고 오늘 사용하는데 저렇게 한 well에서만 새는 현상이 나타나는데

 

Sample과 well loss때문에 신경쓰이네요 방법이 있을까요?

#PCR
 
#전기영동
 
#eletrophoresis
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
dd  |  2020.11.26    

로딩의 실수거나 comb 문제 아닌가요 주로? 

대왕개구리SPEED  |  2020.11.26   
gel tray와 comb이 붙은 상태에서 gel이 굳어
well 밑부분에 gel로 막혀있지 않습니다.
따라서 시료가 밑으로 내려가버립니다.
개구리동물연구  |  2020.11.26   

둘중 하나지요. 겔을 팁으로 구멍을 뚫은 경우

샘플을 천천히 조심히 분주하지 않아서 위로 흘러나온 경우.

실험한 당사자 만이 알 것 같은데요.

알Starflower  |  2020.11.26   

먼저 세분 답변해주셔서 감사드립니다.

dd님 말씀에 comb 문제라는게 어떤게 있을까요..? 콤이 길다는 말씀이실까요?

 

SPEED님 답변을 보면 gel tray와 comb이 맞붙는다 하셨는데,

굳힐때 다 떠있는것 같은데, 이거는 다시한번 확인해보겠습니다.

해결방안으론 뭐가 있을까요?

 

동물연구님 말씀처럼 콕찌르지도 않았고, 위로 흘러나오지 않았습니다. 

로딩시 바로 밑으로 빠져버렸거든요..

dd  |  2020.11.26    

저는 과거에 콤을 너무 과하게...(아마 백퍼센트 호환이 되는 제품이 아니었나봐요....) 끼웠더니 젤에 구멍이 났나 아래로 뾱..하고 새는걸 경험했었거든요...그래서 콤 말씀을 드렸어요! 콤문제라는게 결국엔 젤에 구멍이 났다는거니까....저두 젤에 구멍이 났다고 보여집니다.

대왕개구리SPEED  |  2020.11.26   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
gel을 뒤집어 보면 구멍이 있을겁니다.
gel을 부으면 tray 밑으로 gel이 들어가서 tray가 약간
올라오는데 간혹 tray 바닥과 comb 밑의 공간이 없어질
정도로 붙는 경우가 있습니다.
해결방법은 gel을 붇고 tray 양옆을 손으로 가볍게 눌러
주면 됩니다.
알Starflower  |  2020.11.26   

gel 부을때 밑으로 스며들어가서 그런거군요

다음에 굳힐때는 tray 양쪽 눌러서 그렇게 해볼게요.

 

답변주신분들 모두 감사드립니다🙇‍♂️🙇‍♂️

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