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Hexokinase 효소 실험 (unit 계산)
레벨2 쩜수니 (과기인)
안녕하세요.
평소 bric을 통해 공감과 용기를 많이 얻고 있는 연구인입니다.
제가 새로운 실험을 시작하게 되었는데, hexokinase를 이용한 실험입니다.
Unit 계산이 맞는지 여쭙고 싶어 이렇게 글을 남겨봅니다.
제가 가지고 있는 hexokinase는 1 KU, powder(1 U= 1 umol/min)이며 이를 reaction buffer 1 mL에 용해시키려 합니다. 이어 최종 반응 용액(20 uL)에 glucose 20 mM와 용해시킨 hexokinase, reaction buffer, DW를 첨가하여 30분의 반응시간을 통해 10 mM까지 만들어 보려고 합니다.
이때,
1) 1 KU를 reaction buffer 1 mL에 용해시키면 그대로 1 KU/mL이 맞나요?
2) 이론적으로 1)에서 만든 hexokinase를 이용하여 30 분간 반응할 시, 30 umol/30 min이 되어 용액상태의 hexokinase의 처리량은 약 6 uL(총 반응 용액 부피 20 uL)이면 될까요?
너무 두서없이 적어 죄송스럽습니다만, 효소반응에 관련하여 전문가 분들의 답변이 너무나도 간절하여 남겼습니다. 답변 남겨주시면 감사하겠습니다.
감사합니다.
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