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 전체 > Chemical biology > Analysis
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질문 단백질 정량
올챙이<^^>(대학원생)  | 11.19 19:48

cell extract 8배 희석하여 well 당 5uL씩 x 3 넣었습니다.

흡광도 측정 결과, 0.148 0.141 0.145가 나왔고

평균을 구해보니 0.14467입니다.

표준곡선에 대입한 정량 값은 0.85563입니다.

8배 희석해서 정량 값에 8을 곱해주면 6.845042ug 입니다.

 

그렇다면, 5uL 당 6.845042ug 단백질이 들어있다고 생각하는데,

연구노트에는 1uL 당 6.845042ug이 들어있고, 7uL에는 50ug의 단백질이 있다고 쓰여있습니다. 

→왜 1uL 인지 이해가 안됩니다.

→위 식대로면 7uL에는 50ug이 아닌 47ug이 들어있는 것 아닌가요? 반올림 했다고 생각하면 되는건가요..?

→단백질 정량 단위가 ug인건가요?

 

 

#protein asssay
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  11.19 19:58  

시료를 얼마 사용하더라도 STD와 동일하게 사용하면 단백질 정량 단위는

STD에 따라갑니다.

STD가 mg/ml이기 때문에 ul는 ug이 됩니다.

7ul는 47이라고 봐야 할것 같습니다.

올챙이<^^>  |  11.19 20:08  

well 당 얼마를 넣던지간에 정량값에 희석배수를 곱하여 나온 결과값은 무조건 1uL에 들어있는 단백질이라는 뜻인가요?

대왕개구리SPEED  |  11.19 20:11  

STD 단위에 따라갑니다.

STD를 어떻게 측정했나요?

올챙이<^^>  |  11.19 21:02  

잘 이해가 안되는데 제가 이해한 것이 맞는지 봐주시면 안될까요..

 

standard, sample(cell extract) 모두 well 당 5uL 씩 넣었으므로,

표준곡선이 5uL를 넣은 standard에 의해 만들어짐

따라서 well 당 5uL를 넣은 sample 정량 값이 X가 나오면

이는 1uL 에 들어있는 단백질 Xug

대왕개구리SPEED  |  11.19 21:12  

STD 단위가 어떻게 되나요?

올챙이<^^>  |  11.19 21:27  

std 단위는 1.56mg/mL 입니다.

이렇게 말씀드리면 되는건가요..?

대왕개구리SPEED  |  11.19 21:33  

STD를 몇 point 측정했고 각 단위는 어떻게 되나요?

올챙이<^^>  |  11.19 21:40  

Blank  0   0.1  0.15  0.5  0.75  1.0

   0    0   6.4   9.6   32   49    64 (uL)  --- standard stock (1.56mg/mL)

 

이렇게 넣었습니다. 총량이 100uL가 되도록 용매로 채워 넣었습니다.

 

대왕개구리SPEED  |  11.19 21:57  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

각 STD 용액을 5ul측정했다면 시료 5ul측정값에 mg/ml를 붙이면 됩니다.

따라서 6.845042mg/ml이 되고 6.845042ug/ul가 됩니다.

올챙이<^^>  |  11.19 22:09  

네, 이해되었습니다. 

감사합니다.

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