실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Extraction/Isolation
western blot을 위한 kidney tissue에서 protein을 extraction 할 때 질문입니다.
레벨2 써니22 (대학생)
western blot을 위한 kidney tissue에서 protein을 extraction 할 때 질문입니
다.
제 전에 계셨던 선배님은 마우스 whole kidney를 Lysis buffer와 함께 갈아서,
농도 조절을 위해 D.W에 1/10-5 정도 dilution을 하여 보관했다 사용 했었었
는데요, 시간이 2주 정도 지나니 샘플의 단백질 농도도 떨어지고,
자꾸 샘플이 젤리처럼? 굳어서 ...
저는 이것이 D.W로 희석해서 보관하는 것이 문제라는 생각이 들어서요,
이번에 방법을 바꾸어 whole kidney 말고 조직의 일부를 넣고 lysis 해 볼
생각입니다..
예전에 마우스 골격근에서의 경험으로는 1ml Lysis에 20mg의 조직을 넣었
었는데요, (이 경우 BCA 진행하면 1900ug/ml로 가장 높은 스탠다드보다
살짝 낮았습니다. )
kidney도 동일하게 하여도 될지요 ?
혹시 조직마다 조금씩 다를지 ... 경험이 있거나 조언을 구하려 질문
남깁니다. 감사합니다 !
Bio마켓 프리미엄