실험 Q&A Immunology > Antibody
gold nanoparticle의 aggregation 문제해결방법
레벨1 라뚜 (대학원생)
현재 gold nanoparticle에 gold binding peptide-proteinG를 이용해 antibody를 고정화하는 작업을 하려합니다.
골드에 펩타이드 넣고, incubation 후 가라앉히고 resuspension 시켜서 antibody 넣고 다시 똑같이 진행을 하는데요,
중간에 wash하는 작업에서 자꾸 파티클이 뭉치게 됩니다...
wash step을 빼보아도 어짜피 다음 단계에서 계속 aggre가 되어서 진행이 안되는 상황입니다ㅠ
buffer는 일반 1XPBS에 tween과 BSA 넣어서 쓰고있습니다.
센트리 조건은 12000rpm, 10min으로 돌리다가 센트리 문제인가 해서 9000rpm으로 돌려보고 있습니다.
대체 뭐가 문제일까요?
센트리를 무작정 줄일 수도 없고, salt 조건의 문제일까 싶어서 바꿔보려해도 기준점?이 없으니 막막하네요
혹시 비슷한 실험을 해보신 분 계시다면 조언 부탁드리겠습니다.
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