실험실에서 처음 면역세포 분석을 하게 되서 질문을 남깁니다.

가장 많이 연구된 비장을 가지고 먼저 테스트 해보려고하는데

먼저 저희는 CD4, CD8, CD19와 같은 기본적은 surface 마커들은 분석이 되는데

Foxp3, IL-17와 같이 intracellualr 마커들에 분석이 여러서 질문합니다.

많은 논문들을 참고해서 아래와같이 분석을 진행했습니다.

WT 마우스 비장을 single cell로 분리해서 RBC lysis시킨 후

cell stimulation cocktali(PMA, inomycin, brefelin A)을 넣고 4시간 배양시킨 후

intracellualr staining 키트 방법 그대로 염색을 해서

FACS 분석을 했는데 전혀 발현이 되지 않습니다.

실험방법에 문제가 있는건가 싶어서 TNF-a도 함께 진행했는데

TNF-a는 발현이 제대로 나왔습니다.

제 방법에 문제가 있는건지

아니면 Treg, Th17 세포를 보려면 꼭 분화를 시켜서 봐야하는지 궁금해서

질문남깁니다.

너무 기초적인 질문이라 부끄럽지만 고수분들께 도움을 받고 싶습니다~~