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질문 restriction enzyme이 플라스미드를 완전히 분해할 수 있나요?
앞다리GOHARD(대학생)  | 10.31 16:05
pUC19를 100ng/마이크로리터 농도로
1마이크로리터 사용했고
BamHI을 4U/마이크로리터 농도로
1마이크로이터 사용했습니다
37도 워터배스에서 1시간 반응하고
cut과 uncut을 전기영동으로 확인했는데
uncut은 밴드가 뜨는데 cut은 하나도 뜨질 않았습니다
잡밴드 같은거도 없이 lane이 아주 깔끔했습니다 왜 이렇게 나오는 건가요?
뭐 희미하게라도 뭐가 있으면 모르겠는데
정말 아무 것도 없어서 당황스럽습니다
#restriction enzyme
 
#pUC19
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  10.31 17:18  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

드물지만 비특이적 분해가 일어나는 경우가 있습니다.

DNA는 정확히 넣고 자른것이 맞는가요?

비특이 분해라면 10분, 30분 잘라서 전기영동 해보세요.

혹시 전기영동 사진 있나요?

앞다리GOHARD  |  10.31 19:41  
첨부파일 파일첨부: 10.31 pUC19 cut.uncut.jpg (286 KB)
이미지 첨부파일

맨 왼쪽이 마커고 cut, uncut 반복입니다. 

enzyme 농도는 그대로하고 플라스미드의 농도를 더 높히고

10분, 30분, 1시간으로 반응을 둬서

비교를 해보는게 나을까요?

대왕개구리SPEED  |  10.31 19:59  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

plasmid 양도 너무 적고 band pattern도 이상하네요.

짧은 시간 잘라서 전기영동 해보세요.

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