실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > etc.
protein 동결건조 sample
레벨2 ddw604 (대학원생)
단백질 BSA 정량 후 20ul 에 들어있는 protein 의 양이 너무 적어
농축을 알아보다가 동결건조 방법이 있는걸 알게되었습니다.
엄청 오래된 동결건조 기계가 있어서 일단 작동은 시켜보았는데 자꾸 액체상태로만 e-tube에 남아 질문하게 되었습니다.
sample은 cell에서 lysis buffer로 harvest한 것 입니다.
얼려져있는 sample(e-tube에 , 700ul 정도)의 뚜껑을 자르고 파라필름으로 막고 구멍을 뚫었습니다.
동결건조기의 온도를 -60도까지 내리고, e-tube를 고무뚜껑이 달려있는 유리재질의 통(?)같은 곳에 넣고 pump를 켰습니다.
동결건조기는 eyela 사의 FD-1000 입니다.
구멍 뚫은 곳으로 거품이 올라오더니 밖으로 분출이 되고, 분출된 것은 가루형태로 되었으나 e-tube안에는 액체상태였습니다.
뭔가 잘 못 된것 같아서 이번에는
e-tube를 15ml conical tube에 넣었습니다. 그리고 conical tube을 뚜껑 대신 파라필름으로 막고 구멍을 뚫고 다시 시도해보았는데
밖으로 분출된 것은 없으나 그냥 e-tube에서 모두 액체가 된 듯 했습니다.
시료준비과정에서의 문제인지, 기계의 문제인지 모르겠으나
일단 제가 질문드린 과정에서 잘못된 것이 없는지 확인 부탁드립니다.
감사합니다.
Bio마켓 프리미엄