실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Transformation
Transient expression vector는 나중에 다 분해되어 없어지나요?
레벨1 후_추 (대학원생)
안녕하세요.
지금 원형질체에 transient GFP expresson vector를 transfection시켜
실험을 하고 있습니다.
형질전환후 하루쯤 지나면 GFP 발현이 되는 것이 확인이 되는데,
세포가 분열하면서 plasmid를 나눠가지게 되고 결국에는 GFP가 거의 보이지 않는 것을 확인했습니다. 원형질체 염색체에 integration이 전혀 안되는 것 같더라고요.
그래서 지금 사용중인 GFP vector에 다른 단백질을 코딩하는 유전자를 끼워넣어서 활용해보려고 합니다. 어차피 transient expression을 위한 벡터이니
나중에 세포를 배양해서 DNA 추출해보면 GFP나 목적하는 단백질 유전자가 거의 증폭이 안될 것이라는 생각이 들어서요.
그런데 이 실험이 잘 될지 확신이 들지 않아서
보통 transient expression을 위한 vector들은 나중에 알아서 분해되고 없어지는지 아니면 일부 세포내에 잔존할 수 있는지 궁금합니다.
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