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먼저 stock을 만들어 사용하려는 이유가 뭘까요?
stock을 만들어 한번에 사용하면 무방하지만 여러번 사용하기 위해 만들어
얼렸다 녹였다를 여러번 하면 좋지 않습니다.
여러번 사용하려면 glycerol 등을 넣어야 합니다.
한번에 모두 사용하는 것이 fresh한 상태에서 PCR 결과 확인이 가능합니다.
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레벨1
CLOVA
(대학생)
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20.10.22 10:42
Stock은 한 번 만들고 나면 재사용하지 않고 버립니다.
제가 Protocol을 배우기로는 1μL 단위가 적게 들어갈 수 있어서??
그리고, 많은 샘플을 할 때에 시간 단축을 위해서라고 알고 있는데,
PCR tube마다 각각 해줘야되는 건가요??
cloning이 아니라 검출이 목적이면
3개월정도 냉장보관되는 Pre-mix taq 제품을 쓰셔도 될 거 같은데요
- PCR tube마다 각각 해줘야되는 건가요??
: 실험자 마다 tube 개수 기준이 다를것 같습니다만 1ul도 정확히 취할수 있습니다.
tube가 몇 십개가 된다면 시간 단축을 위해 1 tube에 혼합해서 사용해도 됩니다.
reaction mix를 만들 때 중요한 것은 넣는 용액의 부피가 아니라 농도입니다.
1. Primer 1uL를 넣는 것이 10pmol을 말하는 것이 맞나요?
2. sample DNA 2uL는 매번 동일한 농도의 DNA를 기준으로 말하는 것인가요?
처음에 넣어주는 DNA의 총량이 예전과 다르다면 당연히 밴드의 밝기도 다르게 나올 수 있습니다. 농도와 실제 들어가는 양이 얼마인지 꼼꼼하게 확인하시기 바랍니다.
하시는 연구 잘 되길 바랍니다.