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- His tag으로 정제를 완료한 protein을 sds page로 확인을 했는데 E.coli 내부에
있는 his rich protein이 더 많이 발현이 되어 문제가 생겼습니다
: 결과적으로 정제를 완료한게 아니라 정제가 안된거네요.
affinity 다음에는 band pattern에 따라서 IEX 컬럼정제가 좋을 수도 있고
GF 컬럼정제가 좋을 수도 있습니다.
시료 부피와 농도 그리고 목적 단백질과 제거해야 할 단백질 분자량이 어떻게
되나요?
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레벨1
동동동__
(대학원생)
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20.10.20 16:16
전체 시료의 농도는 0.4mg/ml 정도 되고 목적 단백질은 11kDa, 제거해야할 단백질은 23kDa 정도 됩니다
prep. LC 장비가 있으면 GF 컬럼정제가 편할것 같지만 장비가 없으면
batch 정제 방식의 IEX 정제가 편할것 같습니다.
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레벨1
동동동__
(대학원생)
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20.10.20 19:24
감사합니다ㅠㅠ