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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
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질문 WB 샘플만들때요
올챙이왕초보연구자입니다(과기인)  | 10.15 12:32

제가 WB처음하다보니 4x을 trypanblue 로 잘못 넣은거 같은대요

 

샘플을 다시 처음부터 해야하나요?ㅜㅜ

#WB sample
 
#4x
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  10.15 12:42  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

trypanblue를 사용하나요?

또한 어떻게 잘못넣었나요?

올챙이왕초보연구자입니다  |  10.15 13:01  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

4x 을넣어야 하는대 trypan blue로 잘못 넣었어요 ㅠㅠ

여기에 다시 4x넣으면 안되겠죠?

올챙이돌돌말이  |  10.15 13:22  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

4x는 물질이 아니라 희석 배수 아닌가여??

4x의 sample buffer에 bromophenol blue 이런거 대신 trypan blue를 넣으셨다는 말씀이시죠??

올챙이왕초보연구자입니다  |  10.15 13:30  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

단백질 정량한 후에 단백질+ 4x buffer + DW로 해서 Sample을 만들자나요

여기에서 4x대신에 trypanblue로 넣었어요ㅜㅜ 

대왕개구리SPEED  |  10.15 13:42  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

전기영동이 안되니 sample buffer를 넣으세요.

dd  |  10.15 13:48   

용어부터 제대로 알고 실험하셔야할거같네요.

4X 는 희석 배수 이고, 4X sample buffer 라고 정확히 명칭하시는 습관부터 들이셔야할거같습니다.

올챙이왕초보연구자입니다  |  10.15 14:03  

SPEED 선생님

그럼 지금 trypanblue넣은 샘플에 4x sample buffer 을 넣으라는 말씀이신거죠?

이러고 WB해도 문제는 없을까요

알mickeymouse  |  10.15 19:15  

문제인지 아닌지는 런하면 답이 나오겠죠.....? 

윗분 말씀처럼 4X는 어느 버퍼/시약에도 적용될 수 있는 희석배수이고, 다른 연구실에서는 10X짜리로 사용하는 곳도 있으니 희석배수가 아닌 blue dye나 정확한 명칭으로 말씀하시는 게 좋아요. (4X라고 하셔서 첨 듣는 시약인데 뭐지 싶었어요ㅎㅎ) 

 

 

알뚜루뚜뚜  |  10.18 17:24  

sample buffer에는 단순히 dye 뿐 아니라 여러가지 물질들이 혼합되어있습니다. 그렇기 때문에 단순히 염료만 넣으셨을 때에 전기 영동이 제대로 되지 않을 가능성이 더 큽니다. sample buffer에 들어가 있는 물질들이 전기영동시에 어떤 역할을 하는지에 대해 공부를 해보시는것이 도움이 될것 같습니다.

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