실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
probe qPCR standard curve rfu 값
레벨1 찹호이 (대학원생)
타겟 DNA가 첨가된 플라스미드를 10진 희석하여 스탠다드를 잡고 있습니다.
커브 간격은 그렇다 치고 ct값이 증가할수록 rfu값이 너무 낮게 나오네요ㅠ
10의 6승, 5승 커브가 rfu가 너무 낮게 나오는데 어떻게 해야 할까요?
샘플이랑 같이 돌려도 10의 5승 6승 농도의 샘플은 똑같이 저런 커브가 나와요
threshold를 높일수도 없고 저렇게 나오면 10의 5승 6승 샘플들은 확인을 할 수가 없을 것 같은데ㅠㅠ
몇 번 돌려도 똑같이 나오네요ㅠ
qPCR protocol은 50도 10분, 95도 10분, 그리고 (95도 15초, 50도 1분) 사이클 40번 돌리고 있습니다.
각 well 총량 20ul에 probe primer농도는 10pmol을 1.2ul 사용합니다
Bio마켓 프리미엄