실험 Q&A Microbiology > Bacteria
CFU 측정과 LoD test 이렇게 하는게 맞나요?
레벨2 GE (대학생)
마이코박테리아 추출키트 성능을 위하여 CFU 측정과 동시에 LoD test를 하고 있습니다.
이전에는 1/10씩 희석하여 아가배지에 spreading 한 후 3일 정도 후에 colony 카운팅 하여 ml당 CFU 측정하여 이걸 바탕으로 다시 희석하여 LoD test 하였습니다.
하지만 희석할 때마다 생기는 오차때문에 정확한 CFU LoD test가 안될 것이라 판단 되어, (마이코박테리아라 뭉침현상이 심하여 tween20 으로 풀어주는데도 오차가 크더라구요)
Spreading 할 때 사용한 희석액을 100ul 그대로 따서 바로 추출합니다.
그래서 colony뜨면 그 수 그대로 추출한계에 반영을 시키고 있습니다.
예를 들면,
10^-4 희석액 100ul 에서 56 colony가 떴고, 같은 샘플 100ul로 추출한 샘플의 PCR 결과 Cq가 36이다.
= 56 copies의 Cq는 36 정도이다.
라고 해석해도 되는거 맞겠죠??
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