실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Expression/Purification
Cell density에 따른 protein 변화
레벨1 yakuga (대학원생)
cancer cell에서 molecular work를 진행하고 있는 학생입니다.
실험을 진행하다가 cell에 drug을 treat하고 harvest할 때, seeding을 많이해서 인지 drug이 잘 working을 안해서인지 plate에 cell이 가득 찬 상태에서 harvest를 하였습니다.(time course로 실험을 진행해서 다찼는데도 일단 time을 맞춰서 harvest 하였습니다.)
그 결과 특정 protein이 감소하였는데, drug effect인지 cell이 가득차서 스트레스를 받아서 감소한건지 확인을 하려고 density를 다르게 깔아서 실험을 진행하였습니다.
그결과 density를 높게 seeding 하고 꽉찬상태에서 harvest를 한 sample에서도 마찬가지로 protein이 감소하는 패턴이 나타났습니다.
time point를 맞추기 위해 seeding을 적게하면 너무 적게하는대로 스트레스를 받을 것 같고 많이하면 다 차서 원하는 time point까지 못볼것같습니다.
혹시 다른 cell line이나 primary cell에서도 density에 따라서 protein effect 변화가 많이 있나요?
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