실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
real time PCR 결과 재현성
레벨2 빌루 (대학생)
안녕하세요 최근에 real time PCR을 배워 진행중입니다.
stem cell 을 여러 조건으로 분화시켜 각 조건별 유전자 발현양을 보고 있는데 패턴에 재현성이 안나와 트러블슈팅중에 있습니다.
house keeping gene은 cycle 40으로 했을때 Ct값이 21 정도로 일정하게 나오고, melting curve도 one peak로 보이는데 도대체 뭐가 문제인지 감이 잡히지 않습니다ㅠ
너무 변수가 많은 것 같은데, cDNA 준비부터 다시 해야할까요? 많은 분들 답변 부탁드립니다.
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