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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 real time PCR 결과 재현성
올챙이빌루(대학생)  | 09.22 11:05

안녕하세요 최근에 real time PCR을 배워 진행중입니다.

stem cell 을 여러 조건으로 분화시켜 각 조건별 유전자 발현양을 보고 있는데 패턴에 재현성이 안나와 트러블슈팅중에 있습니다.

house keeping gene은 cycle 40으로 했을때 Ct값이 21 정도로 일정하게 나오고, melting curve도 one peak로 보이는데 도대체 뭐가 문제인지 감이 잡히지 않습니다ㅠ 

너무 변수가 많은 것 같은데, cDNA 준비부터 다시 해야할까요? 많은 분들 답변 부탁드립니다.

#qPCR
 
#유전자 발현 패턴
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
지나가다..  |  09.22 17:50   

재현성이라는 표현이 첫번째 분화 샘플의 qPCR 값과 두번째 분화 샘플의 qPCR 값이 다르다는건지, 아니면 첫번쨰 분화 샘플의 qPCR 샘플을 2번헀을때 재현성이 떨어진다는 건지.. 모호하네요. 

 

각각의 경우마다 트러블 슈팅 방법이 다릅니다.

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