실험 Q&A Microbiology > Fungi
곰팡이 pcr이 되지 않는데 이유를 모르겠습니다
레벨5 촉촉한촉수 (대학생)
곰팡이를 RPB2 PCR을 수행했습니다
PCR조건은
95'C 5min (95'C 1min, 50'C 2min, 72<1'C 증가하는데 5sec>'C 2min)x30, 72'C 10min
이고요
primer는 5F, 7cR 사용했습니다
Phylogenetic Relationships Among Ascomycetes: Evidence from an RNA Polymerse II Subunit
Yajuan J. Liu, Sally Whelen,1 and Benjamin D. Hall
이거 참고해서 진행했고요
4종류 곸팡이를 pcr해서 단 1종만 증폭이 확인되었습니다
반복실험 해봐도 결과는 똑같았고요
곰팡이는 PDA에 25'C 2일에서 3일 키운것을 chelex에 균사를 따서 비드비팅한 다음에 100'C 30분 가열해서 핵산을 추출했습니다
균사를 딸때 잘 안따져서 아가배지가 조금 섞였을 수도 있는데요
동일한 방법으로 핵산 추출해서 진행한 ITS pcr은 결과가 잘 나왔기 때문에
그게 원인인것 같지는 않습니다
Bio마켓 프리미엄