실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > Gene Cloning
안녕하세요 Cloning 초보입니다.. 혼자 공부해보다가 도저히 모르겠어서 질문 남깁니다..
레벨1 duddhr (대학생)
안녕하세요?
cloning construct를 만들어야해서 혼자 공부중인 학생입니다.
그래서 이전에 선배님들께서 만들어놓았던 construct를 혼자 보면서 감을 잡아가고있는데 이해가 안가는것들이 있어서 여쭤봅니다.
1) GFP
벡터에 한 유전자가 들어있는 Construct가 있고(제가 만든것이 아닙니다) 교수님께서 GFP를 보고싶으시다 하셔서 GFP를 달고자 하는데 그 유전자 중간에 GFP Sequence를 넣는것인가요? 그렇게 되면 유전자의 sequence가 달라지지는 않나요....? 또 codon으로 번역하면 서열이 바뀌게 되니까 codon도 바뀌게 되는데 이걸 gfp sequence를 넣어줄때 맞춰주는건가요...?
2) promoter
promoter를 보면 보통 insert dna 바로 앞에 있는것이 아닌 몇 뉴클레오타이드 앞에 떨어져있는데 이것은 왜 그런것인가요? 또한 얼마나 떨어뜨려야한다는 기준이 있나요,,,?
3)tag
Tag도 마찬가지로 유전자 바로 뒤에 붙어있는 것이 아닌 몇 nt 떨어져서 붙어져있던데 이것도 이유가 있나요..? 또한 promoter에서 질문드린것과 마찬가지로 기준이 있나요..? 그리고 기존에 있던 dna의 끝이 stop codon으로 끝나는데 tag을 붙여주려면 유전자의 stop codon을 지워주고 몇 nt 떨어뜨린 다음에 제가 원하는 tag sequence 붙여주고 바로 종결코돈을 넣어 주면 되는것인가요,,,?
진짜 너무 기초적인 질문인데 제가 하나도 몰라서 찾아보다가 도저히 안되겠어서 질문드립니다...죄송합니다ㅠㅠㅠㅠ 진짜 cloning은 처음이라서 혹시 저같은 사람에게 추천하실 논문이나 책있으면 열심히 공부하겠습니다..
Bio마켓 프리미엄