실험 Q&A Laboratory Animals > Histology/Pathology
ATPase staining, oct frozen section
레벨3 dbkorea (과기인)
안녕하세요
ATPase staining을 처음 해보는데 원래 sodium barbital을 사용하는 것으로 알고있는데, 수입이 안된다고 해서 구글에서 Glycine을 사용하는 protocol을 찾았습니다. Glycine 이용 protocol 링크입니다.
http://www.histosearch.com/histonet/Aug06A/RE.HistonetMuscleATPase.B.html
그래서 그대로 진행했는데 fiberes가 type별로 구분된다고 느껴지지 않고, 대부분 다 염색된 것 같습니다. 사진은 ph 9.4에서 진행한 것이고, type2B가 많아서 대부분 다 염색된걸까요? 제가 참고한 protocol 링크를 올립니다. 다른 type의 fiberes들을 연하게라도 염색되게 하려면 어떻게 해야할까요?
그리고, TA muscle인데, 염색 전부터 육안으로도 조직이 갈라져 있더라구요. oct 몰딩해서 -80도 보관 후 동결섹션해서 슬라이드에 붙인 채로 -80도에 보관한 지 2-3달 된 것을 염색했습니다. 슬라이드에 붙인 채로 보관을 너무 오래한 탓일까요? 조직이 염색 내내 잘 떨어지기도 하고 틈이 너무 많이 갈라져 있습니다. 왜그런 걸까요?
histology 관련 선배님들의 도움이 필요합니다 ㅜㅜ 직장에 경험있는 분이 전혀 없어서 problem shooting이 안되니 시약은 시약대로 비용들고 힘드네요...
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