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4.9.1 유산균수
유산균수 측정방법은 MRS 배지, BL 한천배지 또는 BCP첨가 평판측정용배지를 사용하여 유산균의 집락을 계수한다. 시험용액 제조 희석액은 멸균생리식염수(시액 2) 또는 펩톤식염완충액을 사용한다. 검사시료 10〜25 g(mL)에 9배 희석액을 가하여 100〜250 mL가 되게 하고 균질화한다.(10-1용액). 시험용액(10-1용액) 1 mL에 희석액을 가하여 10 mL가 되게 하고 10-2시험용액을 만든 후 동일하게 조작하여 희석한다.
MRS 배지와 BCP첨가 평판측정용배지는 일반세균수의 표준평판법에 준하여 시험하고, BL 한천배지는 각 희석 시험용액 0.1 mL씩을 BL한천배지 2매 이상에 접종하여 멸균초자봉으로 도말한다. 시료가 접종된 페트리디쉬는 35〜37℃에서 48〜72±3시간 혐기배양(발효유류의 경우 호기 배양 가능)한다. 배양 후 생성된 집락수를 측정하고 희석배수를 곱하여 검사시료 g당 균수를 산출한다.
참고문헌 : 식품공전에서 발췌
<a href="http://www.foodsafetykorea.go.kr/foodcode/01_03.jsp?idx=374">http://www.foodsafetykorea.go.kr/foodcode/01_03.jsp?idx=374</a>
육안으론 확인 할 수 없습니다.
유산균 제품이라면 유산균이 많이 자랄테니 뜨는 콜로니들 대부분이 유산균일 것이라 생각하는 수 밖에 없습니다.
그런데 굳이 고등학교 수준에서 알고 싶다면 제품을 희석하여 MRS 한천배지에 도말하고 단일 colony를 채취하여 MRS 배지에 다시 접종하고 배양해봅니다. (단 모든 실험은 무균 환경(클린벤치)에서 수행)
유산균이라면 배양하면 구수하거나 썩 나쁘지 않은 향이 납니다만 대장균이나 기타 유해 균이면 분변 혹은 하수구 시궁창 냄새가 날것입니다.
유전자 수준의 정확한 학명을 알고 싶다면 유산균에서 지놈 DNA를 추출하고 리보조말 RNA 영역을 증폭하고 cloning해서 유전자 시퀀싱 업체 맡겨 유전서열을 확보합니다. 그리고 BLAST를 이용하여 유전서열 동정을 하면 되지요.
물론 이것들을 고등학생 수준에서 어렵습니다.
더 간단한 방법은 마크로젠 바이오니어 같은 시퀀싱 전문업체에 잘 배양된 한천배지를 맡기면 2만원 안으로 위와같은 과정을 거친 균주 동정을 해줍니다.