실험 Q&A Immunology > Immunofluorescence
immunofluorescence assay 에서 항체의 타겟셀이 아닌 다른셀에 염색이 됩니다ㅜ
레벨2 뿌압뿌양빠앙 (대학원생)
전혀 다른 종류의 세포 두종을 혼합배양해서 IFA를 진행하고 있습니다
세포1 , 세포2 이라고 치면
세포1을 모노레이어 배양하고 SNARF 염색한뒤에
세포2를 그 위에 혼합배양 한뒤 시간별로 fixation하고 3% BSA로 블러킹후 세포2의 항체를 1차로 o/n붙이고 2차로 antimouse IgG FITC를1시간동안 1:100비율로 붙였습니다
근데 봤을 때 세포2에만 fitc형광이 보여야하는데 세포1에 FITC형광이 전체적으로 보여서 데이터로 도저히 쓸수가 없습니다. 시그널을 죽이면 세포2의 형광도 같이 죽어서 보이질 않고..
실험방법 중에 어떤것이 잘못된걸까요ㅠㅠ
어떤 부분의 실험방법을 수정하면 좋을까요
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