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CP cell은 외부 DNA를 넣을 수 있는 상태로 만든 cell을 부르는 용어입니다.
세개 균이 외부 DNA를 넣을 수 있는 상태로 만들었으면 모두 CP cell로
부릅니다.
단백질을 발현 시키는 것은 cell의 유전적 특징에 따라 달라지는데 이 세개의
cell은 genotype이 서로 다르기 때문에 다른 cell입니다.
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레벨1
청포도
(대학생)
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20.09.15 08:28
답변해주셔서 감사합니다!
그러면 rosetta(BL21) 이렇게 써있거나 rosetta(DE3)라고 써있는건 무슨뜻인가요?
rosetta(BL21)라는 균주가 있나요?
모든 균주는 genotype을 보면 특징을 알수 있습니다.
rosetta(DE3)는 BL21에서 변형된 균주로 여분의 tRNA AGG, AGA, AUA, CUA,
CCC, GGA를 제공합니다.
IPTG 존재하에 단백질 발현 조절이 가능합니다.
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레벨1
청포도
(대학생)
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20.09.15 09:57
네 감사합니다!!! BL21에서 변형되어진게 DE3라는 뜻이군요!! 감사합니다ㅠㅠ
DE3가 BL21에서 변형되었다는 뜻이 아닙니다.
rosetta 균주가 그렇다는 뜻입니다.
대장균의 이름에 DE3가 들어간 것은 대장균 유전체내에 박테리오파지 lambdaDE3가 삽입된 것이며 이 박테리오파지에 T7 RNA polymerase 유전자가 lac 프로모터와 같이 들어 있습니다.
가령 E. coli BL21이라면 protease ompT-negative 균주라서 단백질이 분해되지 않고 잘 발현되는 균주라는 의미이며, E. coli BL21(DE3)라고 되어 있으면 IPTG에 의해서 T7 RNA polymerase 가 induction된다는 의미입니다.
그래서 lac 프로모터로 induction시키는 벡터는 E. coli BL21에서 사용 가능하지만 T7 promoter로 induction시키는 벡터 가령 pET15b 같은 벤터는 사용하지 못합니다. 이런 벡터는 E. coli BL21(DE3)에서만 사용합니다.