실험 Q&A Mol. Biol.-Protein > Western Blot
Sample buffer의 beta-mercaptoethanol 에 대한 질문입니다.
레벨5 힘들다힘들어 (대학원생)
안녕하세요?
저희 연구실에서 사용하는 beta-mercaptoethanol(이하 2-ME) 를 1ml 의 샘플버퍼에 20ul 가 되게끔 하여 넣고 있습니다.
저는 주로 5X sample buffer 를 사용중인데, 최근에 reducing, non-reducing 을 봐야하는 샘플군이 있어서 2-ME를 있고 없고 하게 진행하였는데, (lysis buffer 에는 DTT가 들어있지 않습니다.) western 할 때마다 밴드의 양상이 달라집니다. 전반적인 양상은 비슷합니다만 monomer, dimer 의 양이 달라지게 보입니다.
혹시 1ml 의 샘플버퍼의 20ul 의 2-ME의 양이 너무 적나요? 적당한 2-ME의 양이 궁금합니다.
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