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레벨1
refute
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20.09.10 17:54
이론적으로는 바이러스로 transduction해서 cell line이 한번 만들어졌으면 계속 남아있어야됩니다.
하지만 homologous chromosome의 한쪽 allele에만 gene이 integration 됐을 경우에는 도로 뱉어내는 경우도 있다고 하더군요.
정 불안하시면 shRNA 벡터 안에 있는 antibiotice resistance gene에 맞게 selection을 진행해보시구요, gDNA prep을 해서 shRNA 발현 시퀀스에 대한 PCR로 genotyping을 해보는것도 방법입니다.
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레벨5
새슬
(과기인)
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20.09.11 09:43
정성스런 답변 감사드립니다.
계속 puro 치고 있는데, 벡터 안들어간 애들은 다 죽고 들어간 애들은 잘 자라긴 합니다.
그럼 cloning 때 사용했던 프라이머로 sequencing 해보면 될까요?
감사합니다.