실험 Q&A Laboratory Animals > Animal Models
db/db genotyping 문의드립니다.
레벨1 student EH (대학원생)
db/db mice genotyping 문의드립니다~
LepR 와 Neo primer를 이용해서 Hetero, db/db, WT 을 확인하려고 하는데요.
여러가지 annealing온도로 돌려보았을 때, 56도에서 비교적 밴드가 선명하게 보이는 걸 확인했습니다.
근데 밴드가 비교적 선명하게 보인다고 해도 구분할만큼의 선명도는 아니라서 문의드립니다.
1. 다른 db/db genotyping 문의들을 봤을 때 ,PCR 수행후, Rsa1제한효소를 처리해서 확인하는 방법을 사용하는 것으로 보이는데, 제가 하는 방법도 괜찮은 건가요?
2. 밴드가 희미하게 뜨기 때문에, annealing온도를 많이 바꿔보았고, 그나마 57도에서 밴드가 확인이 되었는데, annealing온도 이외에 바꿔볼 수 있는 조건이 무엇이 있는지, 있다면 어떻게 바꾸는 게 좋을까요?
답변주시면 감사드리겠습니다 ㅠㅠ
오랜시간 해결이 되지 않아서 이렇게 문의드립니다.
감사합니다.
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