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제가 정확히 이해하는진 모르겠는데, Infusion이랑 Gibson이랑 결이 같죠? Gibson의 경우 많은 사람들이 젤을 걸어서 자르면 안된다고 하는데, 그 이유가 비슷할 것 같긴하네요;; 젤자를때 UV로 쬐야하니. 저의 경우는 교수님들께서 젤로하면 Gibson이 잘 안된다고해서 한 번도 해본적이없는데, 아마 비슷할 것 같습니다.
제가 깁슨할때는 그냥 REenzyme으로 짜른 후 바로 heat inactivation이나 PCR purification해서 쓰고 PCR product는 일부만 걸어서 사이즈 맞으면 PCR purfiication해서 씁니다.
UV때문일지는 한번도 생각 해 본적없는데, 말이 될것같긴하네요..
Infusion cloning 뿐만 아니라 DNA work에 사용하는 모든 DNA는 DNA에 손상을
주는 UV 노출을 최소화 해야 합니다.
DNA work의 기본이기 때문에 항상 UV에 주의해야 합니다.
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레벨1
바박
(대학생)
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20.09.02 12:06
그러면 벡터를 엔자임으로 자른 뒤에는 잘려져 나간 부위는 어떻게하나요? 그냥 피씨알 퓨리를 하고 바로 깁슨에 사용하신건가요? 그리고 피씨알 할 경우에 멀티밴드나온 산물의 경우에는 젤 퓨리를 해줘야할텐데 그런 피씨알 산물의 경우에는 어떻게 해결하셨나요?