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어떤 단계에서 시간 단축을 원하는지 알아야 조언이 가능합니다.
추출 단계에 따라 가능할수도 있을겁니다.
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레벨1
남남지지현현
(일반인)
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20.08.19 20:00
아 말씀을 잘못 이해해서 다시 올립니다 그 일반적으로 50도로 30분 동안 중탕하는 과정을 줄이고 싶습니다 ㅠㅠㅠ
lysis 단계인것 같은데 cell 양이 적으면 조금 줄여도 되고.. 조건에 따라
조금씩 다릅니다.
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레벨1
남남지지현현
(일반인)
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20.08.19 20:37
실험영상을 찾아보면 극소량임에도 30분씩 기다려서 감이 안 오네요 ㅎ...ㅎ 혹시 대체할 수 있는 방법이 있거나 생략가느한 부분은 아닌건가요
실험방법에 따라 다릅니다.
phenol 방법은 생략 가능하고 column 방법은 생락하기 힘듭니다.
하지만 gDNA 순도를 위해 진행하는 것이 좋습니다.
세제(계면활성제)를 넣고 50도시 30분 열처리는 DNA는 변성되지 않으면서 단백질만 변성시키기 위한 단계입니다.
세포막을 이루는 지질이중막을 세제가 녹이는 과정인데 세포막의 단백질을 변성시켜서 세포가 잘 용해되도록 하는 과정입니다.
이 단계를 안하거나 줄이면 DNA 분해 효소 등의 단백질의 활성이 살아있어서 DNA 손상을 일으킬 수 있습니다.