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내려갈 때 sample의 BPB line은 어떻나요?
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레벨2
실험싫엄
(대학원생)
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20.08.13 18:52
사진은없는데 일자로 잘 내려갑니다!
마커보면 위쪽은 나름 반듯한데 아래쪽 으로 내려갈수록 저렇게 휘어지는게 있더라고요!
마커는 내려갈때 보일텐데 정상적으로 내려가나요?
예전에도 아세톤 침전 시료의 마커만 퍼지나요?
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레벨2
실험싫엄
(대학원생)
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20.08.13 19:27
먼가 저 45kda 길게늘어진 부분을 동그랗게 감싼거처럼 피해서 내려가는 느낌입니다 제가 잡으려는건 75빨간 마커 위에라서 밴드는 깔끔하게 나오는데 그 아래 밴드가 휘어지는지는 모르겠어요
두번째인데 두번 다 마커가 저렇게 되네요!45kda쪽이
보통 마커가 휘어지면 바로 옆 sample에 영향을 받아서 그렇습니다.
폰슈 염색 사진을 봐야 정확하 원인을 알수 있을 것 같습니다.
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레벨5
힘들다힘들어
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20.08.14 00:40
아세톤 농축은 안해보았지만 media western blotting을 굉장히 많이 했는데요, FBS+ media 셨다면 알부민 때문에 저런 휘는 현상이 생깁니다.
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레벨2
실험싫엄
(대학원생)
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20.08.14 09:59
0.1%로 사용했는데 사이즈가 알부민 때문이거같네요 감사합니다
알부민은 66kda이고 전기영동 해도 휘어지지 않습니다.
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레벨5
힘들다힘들어
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20.08.15 20:20
네 사이즈는 아는데요, media 로딩양이 많아지면 밀려 내려와서 저렇게 휘더라구요. 0.1% FBS 였어도 농축과정에서 FBS의 총량이 많아졌을 수 있다 봅니다.
저는 10% FBS 배지 50ul 로딩해도 저런 현상이 발생했었습니다.
한번 폰슈해보시면 저 부분 굉장히 진하게 붉게 60kda 정도부터 불룩하게 내려온 밴드를 볼 수 있을겁니다.