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질문 CRISPR에 대하여 공부하던 중 의문점이 생겨 질문드립니다.
알paulrheesiff(일반인)  | 08.09 21:47

과학 중점 일반고등학교에 다니고 있는 현재 고등학교 3학년 학생입니다.

CRISPR에 대해 공부하던 중 질문이 생겨 질문드립니다.

CAS 9 Complex에서 gRNA가 특정 염기서열을 인식하고  double helix를 풀은뒤에 CAS 9이 공유결합을 제거하여 특정 염기서열이 제거되면 세포가 이를 다시 바로잡기 위해 복구를 시도하고, 이 과정이  mutation을 만들 가능성이 다분한것으로 알고 있습니다.

그렇다면 CRISPR을 이용한 특정 염기서열을 제거하려 할때 gRNA가 특정 염기서열과 결합하고  CAS 9이 제거하는 방식만을 통해 염기서열을 제거하는지, 아니라면 특정 염기서열 제거후 세포의 염기서열 시도 복구과정에서 일어난 mutation으로 인해 새로 합성된 염기서열이 뒤따른 염기서열을 망가뜨림으로서 뒤따른 염기서열들을 제거하는 방식을 사용하는지 어떤 방식이 맞는 방식인지 알려주신다면 감사하겠습니다.

 

해당 의문점은  https://www.youtube.com/watch?v=4YKFw2KZA5o 의 1:24 부분을 보며 생긴 의문점입니다. 질문자체가 명확한지 잘 모르겠어서 이해에 도움이 되시길 바라며 링크 첨부해드립니다. 

#CRISPR
 
#CAS9
 
#gRNA
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리BlackSmile  |  08.11 15:18  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

CRISPR-Cas9 system에서 Cas9의 역할은 특정 염기서열을 제거하는 것이 아니라 cleavage를 하는 것입니다.

특정 site에 target-specific cleavage가 일어나게 되면 세포가 이를 고치기 위해서 DSB(Double strand break) repair가 일어나게 되는데, 복구과정에 NHEJ에 의해서 새로운 염기서열이 끼어들어들 수가 있습니다. 이렇게 되면 Protein의 Frame-shift mutation이 일어나게 되고 그로 인해 제대로 된 기능을 하지 못하는 단백질이 만들어지게 되고 knock-out의 효과가 나타나게 됩니다.

알paulrheesiff  |  08.11 18:42  
단백질이 만들어지더라도 아예 다른 단백질이 만들어지거나 stop-codon이 생겨 knock-out의 효과가 나타나게 된다고 이해하는게 맞는것인가요?
답변 감사합니다
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