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질문 Collagenase type 2 사용 시에 Cacl2를 첨가해주시나요?
알중심적중심(대학생)  | 08.06 14:09

안녕하세요 ! 현재 mouse renal primary culture를 set-up 하고 있는 대학원생입니다. 현재 저는 collagenase type2를 HBSS(calcium,magnesium-free)에 녹여서 digestion시킬려고 하고 있는데요. Collagenase의 경우 ca가 필요하다 하는데 어떤 protocol에서도 Ca를 넣어주었다는 내용이 없어서요 ㅠㅠ PBS에 녹여서 사용하였다는 protocol도 있는 것을 보면 유동적으로 하는 것 같습니다. 혹시나 Collagenase를 이용한 digestion을 하실 때에 Ca 없는 buffer에 녹여서 사용해보신 분 계실까요? 제가 사용하고 있는 collagenase는 동결건조된 형태입니다 ! 답변에 미리 감사드립니다 

#collagenase
 
#renal
 
#kidney
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  08.06 15:29  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

Collagenase 처리 시 Ca2+, Mg2+, Ba2+, Mn2+ 이온이 있으면 활성이 촉진되지만

없다고 활성이 없어지는 것은 아닙니다.

그리고 EDTA, mercaptoethanol, reduced glutathione이 있으면 활성을 억제합니다. 

알중심적중심  |  08.06 17:48  

speed 선생님 감사합니다! 그럼 protocol대로 Ca를 따로 첨가해주지 않고 실험 진행해보겠습니다. 정말 감사합니다 ! 

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