[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보  |  e브릭몰e브릭몰 sale 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
검색광고안내
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
과학으로 본 코로나19 (COVID-19)
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Immunology > Immunoprecipitation
조회 200  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 IP 실험
알HUM(대학생)  | 08.04 21:22

안녕하세요. IP 실험을 처음하는 대학원생입니다.

실험디자인에서 antibody를 아예 넣지 않는 군은 어떠한 역할을 하는지 궁금해서 질문남깁니다.

 

#IP
 
#immunoprecipitation
 
#co-IP
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
올챙이콩순이  |  08.05 13:12  

Total Input을 의미합니다.

사람들은 IP, co-IP를 낚시질에 비유하죠. 바다건너 미쿡에서도 fishing이라고합니다. 

안티바디를 넣고, 거기에 붙은 단백질만 건져내는 과정이니까요. 

 

만약에 A라는 단백질에 대한 안티바디를 가지고 낚시를 하면,

마지막 elute에는 A 단백질만 있을테니, 웨스턴으로 하면 진하게 보이겠죠.

100이면 100 다 A단백질일겁니다.

(사실은 A단백질과 붙어있는 애들도 딸려나옵니다.  cell lysate를 fix하고 시작하죠.

내가 아는 A 단백질랑 픽스한 순간 함께있었던 친구들은 A에 대한 안티바디로 건져내면 다 같이 나올테니. 훗훗훗 ==> 이렇게 하면 co-IP)

 

그런데 토탈 input은 모든 세포내의 단백질들이 다 섞여있는거니까,

100개 중에 1개만 A단백질일테니, 웨스턴으로 하면 흐리게 보이겠죠. 같은 웨스턴 블랏에서요.

 

일차원적으로는 내가 낚시를 잘했다 는걸 보여줄수 있고, 

A에 대한 낚시를 한 후, B에 대한 항체를 붙였을때 비교군이 되어줍니다. 

 

그리고 컨트롤엔 IgG를 넣어준 그룹이 필요한데,

항체는 specific하면 할수록 좋지만 non-specific한 경우가 많고 

bead와 Ab를 crosslinking을 시키시는지 모르겠지만,

아니라면 마지막 elute에서 bead에서 떨어져나오 Ab의

heavy chain, light chain이 WB develope에서 나오게 되니,

항체 자체에 대한 컨트롤이 되어줄겁니다. 

 

컨트롤은 네가티브든 파지티브든 정말 언제나 항상 중요합니다~ 

 

화이링~ 

답변하기
할인행사 광고 검색광고
케이비티 케이비티
Mixer, Dry Bath, Heating Block, Thermo Shaker, Shaking Incub.. (10.22까지)
다온비에스 다온비에스
내 소중한 세포를 위해 안심하고 맡길 수 있는 WOLF Cell Sorter를 경험하세요! (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
무료 샘플로 명품 NEB의 DNA/RNA Purifucation 성능을 경험하세요. / NEBulider®.. (9.29까지)
에펜도르프코리아 에펜도르프코리아
[에펜도르프코리아] Eppendorf 2020 하반기 프로모션 행사 : 실험실 필수품 피펫,원심분리기,PCR.. (12.31까지)
인성크로마텍 인성크로마텍
Phenotype MicroArray™ - Live Cell 에너지 대사 & 감수성 프로파일링 (10.31까지)
브래디 브래디
[브래디] 초저온라벨 등 실험실용 라벨링 솔루션 (COVID19 안전사인 등) (10.30까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
TECAN 한국대리점 20주년 기념 Microplate Reader & Washer 할인이 쏟아진다! (12.31까지)
프리미엄 등록안내
외부제휴사 광고 AD
e브릭몰
5/6  좌우
242,40072,800
201,30060,400
887,200266,200
80,40024,200
79,50075,600
793,400238,100
309,000
238,70071,700
924,000
245,20073,600
379,000
158,40047,600
388,500116,600
739,000702,100
555,000
246,60074,000
136,000129,200
50,00015,000
139,000132,100
47,20044,900
230,000
143,800136,700
22,7006,900
136,000
최근등록   더보기 >
대학원 고민이요   09.22
real time PCR 결과 재현성   09.22
colony pcr한번만 도와주세요 ㅠㅠ   09.22
od 600과 e.coli에 대한 질문   09.21
유산균 내담즙실험   09.21
피브린 제거하지 않은 혈액을 구하는 방법이 있을까요?   09.21
*B16F10이용 a-MSH assay 프로토콜 확인해주세요*   09.21
염증성 cytokine 발현 실험할때 주로 사용하는 방법과 바이오마커를 알려주시면 감사하겠...   09.21
세포오염   09.21
동결건조기를 사용한 마우스 조직의 동결건조 방법이 궁금합니다.   09.21
(주)비아이코퍼레이션
실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
이제욱 연재중생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
ZEUS
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아 광고