실험 Q&A Cell Biology > Cell Culture
HUVEC 배양, 배지 관련해서 질문드립니다.
레벨5 시은 (대학원생)
안녕하세요
최근 브릭의도움을 많이 받고있는 대학원생입니다.
현재 저희 실험실에서 이전에 배양 하지 않았던 새로운 cell들을 구입해서
기본적인 배양과 실험의 기본적인protocol을 셋업중에 있습니다.
지금 하고자 하는건 HUVEC입니다만..
현재 구입한 스탁은 풀지않고 보관중인데요
제가 찾아본 프로토콜 상에서는
dish에 젤라틴 코팅 한 후 배양을 권장하더군요 일반 배양 dish에 해도 괜찮다고는 하는데 모양이 이상해 진다는 의견이 많았습니다.
또 배양 배지는 여러가지 가 있었는데
1) M199 , 20% FBS, heparin 500U, 1ug bFGF
2) lonza, EGM-2 (FBS 2%)
들이 많이 보였습니다.
현재 실험실에는 sciencell에서 나온 ECM을 가지고 있는데 구매를 basal media만 구매를 하고 함꼐 판매하는 FBS와 Endothelial Cell Growth Supplement는 구매를 하지 않은상태입니다.
저 ECM 배지에서 HUVEC cell배양해 보신 분이 계실까요?
Q1) 혹시 ECM basal media에 FBS 5% 로 제작 후 Growth Supplement는 넣지 않고 HUVEC 배양이 가능할까요..? 찾아보면 FBS 함량은 20%부터 5% 2%로 너무나도 다양해서 어떻게 결정해야 할지 잘 모르겠어서 이렇게 질문드리게 되었습니다.
Q2) HUVEC culture후 Tube formation을 진행하고자 하는데 그때는 gelatin이 아닌 matrigel코팅해 주면 될까요? 그리고 혹시 이때 tube formation을 위한 배지가 따로 있나요? protocol찾아보면 200PRF이 많이 보여서 질문드립니다. 아니라면 배양 배지로 tubeformation진행해도 될런지...
너무 기초적인 질문 드려 죄송합니다.
브릭 이전 질문들을 찾아보긴 했으나 와닿는 내용이 얿어 이렇게 다시 질문 드리게되었습니다.
감사합니다.
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