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질문 HUVEC 배양, 배지 관련해서 질문드립니다.
개구리시은(대학원생)  | 08.03 17:45

안녕하세요 

최근 브릭의도움을 많이 받고있는 대학원생입니다.

 

현재 저희 실험실에서 이전에 배양 하지 않았던 새로운 cell들을 구입해서 

기본적인 배양과 실험의 기본적인protocol을 셋업중에 있습니다.

 

지금 하고자 하는건 HUVEC입니다만..

현재 구입한 스탁은 풀지않고 보관중인데요

 

제가 찾아본 프로토콜 상에서는

dish에 젤라틴 코팅 한 후 배양을 권장하더군요 일반 배양 dish에 해도 괜찮다고는 하는데 모양이 이상해 진다는 의견이 많았습니다.

또 배양 배지는 여러가지 가 있었는데

1) M199 , 20% FBS, heparin 500U, 1ug bFGF

 2) lonza, EGM-2 (FBS 2%)

들이 많이 보였습니다.

현재 실험실에는 sciencell에서 나온 ECM을 가지고 있는데 구매를 basal media만 구매를 하고 함꼐 판매하는 FBS와 Endothelial Cell Growth Supplement는 구매를 하지 않은상태입니다. 

저 ECM 배지에서 HUVEC cell배양해 보신 분이 계실까요?

Q1) 혹시 ECM basal media에 FBS 5% 로 제작 후 Growth Supplement는 넣지 않고 HUVEC 배양이 가능할까요..? 찾아보면 FBS 함량은 20%부터 5% 2%로 너무나도 다양해서 어떻게 결정해야 할지 잘 모르겠어서 이렇게 질문드리게 되었습니다. 

 

Q2) HUVEC culture후 Tube formation을 진행하고자 하는데 그때는 gelatin이 아닌 matrigel코팅해 주면 될까요? 그리고 혹시 이때 tube formation을 위한 배지가 따로 있나요? protocol찾아보면 200PRF이 많이 보여서 질문드립니다. 아니라면 배양 배지로 tubeformation진행해도 될런지...

 

너무 기초적인 질문 드려 죄송합니다. 

브릭 이전 질문들을 찾아보긴 했으나 와닿는 내용이 얿어 이렇게 다시 질문 드리게되었습니다. 

감사합니다.

#huvec
 
#cell culture
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
지나가다..  |  08.04 09:17   

처음하시는거면요.. 커스텀 배양배지 사용하지 마시구요.

세포 제조사에서 권장하는 제품과 농도로 사용하세요. 

세포를 구입한 것이 아니라면, 본인이하려는 실험과 가장 유사한

논문의 레퍼런스 그대로 하는게 좋습니다. 이방법 저방법 섞어서 하면

나중에 트러블 슈팅하기도 어려워요. 

 

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