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질문 멸균한 배지에 균이 자라요
알윰당(대학원생)  | 08.03 14:57

 

안녕하세요, 미생물학 전공으로 석사 2학기 차를 맞이하는 대학원생입니다.

올해 초부터 쭉 배지를 만들어 미생물 실험을 하고있는데요,

최근 들어 배지에 균이 자라는 현상이 발견되어 다소 혼란스럽습니다.

 

제가 사용하는 배지의 종류는 LB agar로, autoclave에 멸균을 하고 사용하고있습니다.

plate를 실온에서 식혔다가 하루동안 Incubator에 넣어두고, sweating이 사라졌는지 확인하려고 꺼내보았는데, 기존에는 보지못했던 알수없는 균이나 곰팡이가 자라있더군요

(50개를 만들었는데, 그중 반이상이 그런 현상이 나타났습니다.)

 

문제가 있겠거니 하고, 멸균 시간을 좀더 늘리고 이번에는 실온에 2일 이상 두면서 굳혔습니다.

주말동안 비가 오고 온도가 올라가 습하고 더운 탓인지 이번에는 fungi가 엄청 생성되어있더라구요..

 

멸균 처리를 했음에도 불구하고 균이 자란 이유가 어떤것일지 궁금합니다.

실험실 공기가 좋지않아서 일까요? 또는 실온에 방치해둬서 그런것일까요?

 

#미생물
 
#배지
 
#오염
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  08.03 15:01  

autoclave, clean bench를 한번 점검해 보세요.

대왕개구리강시  |  08.03 15:23  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

오토클레이브가 제대로 작동하지 많았거나,

플레이트에 배지를 부을때 멸균조작이 서툴렀을 것입니다.

클린벤치를 사용했다면 헤파필터 교체주기를 확인해 보세요.

만일 클린벤치를 사용할 수 있다면 배지가 굳은 후 플레이트 뚜껑을 열고 UV를 켜 두세요.

그러면 설령 오염이 되었더라도 배지에 곰팡이가 자리는 일은 없을겁니다.

단, 오염의 원인을 찾지 않고 땜빵만 하면 다음번 오염을 피할 수 없으니 반드시 오염의 원인을 찾아서 해결하세요.

뒷다리토라  |  08.07 15:43  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

실온에서 2일 이상 굳히나요? 그렇게 잘 안굳진 않을텐데..

저희 실험실은 바이오세상 제품꺼 쓰고 있고

저희는 클린 벤치에서 진행하고있는데

클린벤치가 정상적인 상태에서 뚜껑 반쯤 덮어놓고 한두시간 정도면 다 굳고, 

물기도 말라있어서 바로 비닐에 보관에서 밀봉해서 냉장고에 넣어둡니다.

Ampicilin, Kanamycin, 아무것도 없는 LB 세가지로 만드는데,

너무 오랫동안 냉장고에 보관해서 곰팡이가 자라던가

서리처럼 뭔가 자라서 못 쓰게되는 경우는 많았어도,

키우자마자 곰팡이가 자란적이 없었으니 2일동안 인큐베이터 안에서 말려두는 것 자체 혹은 오토클레이브의 문제로 보이네요.

꽃개구리착한사람  |  08.08 12:31  

오토클레이브가 원인일 가능성이 커보이네요

온도와 압 체크해보세요

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