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사용한 1차 항체 번호가 어떻게 되나요?
아래 band가 cox-2일 겁니다.
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레벨1
우희
(대학생)
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20.07.30 14:48
사용한 항체는 CST사의 12282s 품종입니다. dats sheet 상으로는 74 kDa이라고 나와있습니다만, protein marker에서 63 kDa 주위에 뜹니다 ㅠㅠ
분자량이 70~74kda 부근이 아니라면 둘다 아닐가능성이 높고 일부 분해되어
2band로 나왔을 가능성이 있을 것 같습니다.
70~74 부근에는 band가 안나오나요?
lysis 시 PI cocktail은 첨가하나요?
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레벨1
우희
(대학생)
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20.07.30 15:07
membrane 사진 보여드립니다. 빨간 밴드가 75kDa인데 자꾸 저렇게 63kDa 부근에 뜹니다. 더블 밴드도 매번 마찬가지이고요... lysis 할 때 RIPA buffer와 PIC 섞었습니다.
4번째 lane의 제일 위의 연한 band가 cox-2인 것으로 보입니다.
시료가 mouse skin 조직인가요 아니면 세포인가요?
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레벨1
우희
(대학생)
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20.07.30 15:20
근데 저 연한 band는 이번 실험에만 나온 것이지, 예전에 진행했던 실험에서는 나오지 않았습니다.
mouse 등 부위 skin 사용했습니다!
normal tissue에서는 COX-2가 거의 없지 않나요?
Raw cell이 있으면 자극한 후 한번 detection해보세요.
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레벨1
우희
(대학생)
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20.07.30 15:26
mouse 등에 질병을 유발하여 COX-2와 같은 염증 signal을 보는 실험이었습니다. 아무래도 Raw cell로 한 번 해봐야 할 것 같네요... 감사합니다!